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哥哥,姐姐们,请帮个忙(关于LD-PCR电泳结果)


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1# 大 中 小 发表于 07-8-17 15:58  只看该作者

哥哥,姐姐们,请帮个忙(关于LD-PCR电泳结果)

大哥哥,大姐姐们,你们好!
我做cDNA文库构建,反转录第一链后,做LD-PCR,发现电泳条带弥散历害

1从点样孔开始弥散
2整个条带中间没有亮带(理论上应该是有组织特异性的mRNA会导致中间有些地方会出现cDNA的亮带)

做了好多次了,都是这样?

不知是什么原因?请了解这方面的师兄师姐们,帮帮忙好吗?

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2# 大 中 小 发表于 07-8-19 17:08  只看该作者
你的PCR体系验证过吗？

还有，电泳的时候，琼脂糖凝胶的配制也很重要。

最重要的一点：你的模板质量如何？

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3# 大 中 小 发表于 07-8-27 06:27  只看该作者

1x buffer

配制琼脂糖凝胶的时候要用1x的电泳buffer

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