单克隆抗体

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本篇内容：! T& Q  B6 m  a: M" c
1.单克隆抗体概念和制备原理
; |- T) ]* V! N2 D2.单克隆抗体制备方法
7 K! s: ^% U. ?9 x3.单克隆抗体纯化
0 o( T7 k, c' d( ?4.单克隆抗体标记0 {. j+ [- D- U, S$ o. P
5.单克隆抗体制备常见问题分析
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致谢：, T; p) J$ E* X* h4 v- \
整理者：phyllis  审改者：peliang( ], g' i$ L3 b/ `( s. l- F
主要参考资料：《抗体制备方法与原理》、《单克隆抗体研制》- X+ F2 r. Z  u! q. t$ U# Z3 A) @
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[ 本帖最后由 nano 于 08-9-13 20:22 编辑 ]

单克隆抗体概念和制备原理

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基本概念
6 R  c) `& z* {0 ]5 n　　抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙，即克隆由许多个被激活B细胞的分裂增殖形成多克隆，并合成多种抗体。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体，称为单克隆抗体（monoclonal antibody,McAb）。
  T7 `( k4 ^/ H0 V5 F/ _5 v- a制备原理
$ O. s2 `7 a% {/ ^; p; T+ i　　要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖，应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一，得到杂种的骨髓瘤细胞。这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性，它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性，用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。其制备原理示意如下：
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优点
& k+ K& m+ A% Z1 W( j" Q. L　　单克隆抗体与常规抗体相比有如下优点：  k* P3 `0 w2 G7 |( k# F; v
1. 单一特异性，与一个抗原决定簇反应；
1 w: Z, U/ b$ X4 a( S2.  可重复性，能够提供完全一样的抗体制剂；+ d$ t4 ]% N$ {3 M9 v7 f( ~, ]
3. 一经制出，可无限量地供应；$ i7 v3 _$ y+ a3 x" \" L3 s8 s
4. 生产单克隆抗体，不一定需要纯的抗原；' U1 w* l6 N7 m
5. 能查出混合物中存在的用常规方法查不出的少量成分。

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谢谢楼主，正在做单抗，好好学习一下。

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