现在给大家介绍一种快速鉴定质粒的方法：
        在加入溶液1混匀后，再加入等体积的苯酚：氯仿：异戊醇混匀，之后加入1/10体积的10×Loading Buffer混匀，离心十分钟后取上清电泳就可以了。
 
        这个方法我们实验室已经作了很久，效果很好。

苯酚：氯仿：异戊醇的比例是1：1：1吗？

请问这个方法对于革兰氏阳性和阴性菌是否都适用？

我这两天在抽提枯草芽孢杆菌的质粒，这是一种革兰氏阳性菌，需要在溶液1中加入溶菌酶破细胞壁的。 可是怎么也提不出来（手提和试剂盒提都不行），想试试你介绍的方法。

苯酚：氯仿：异戊醇的比例是25：24：1. 至于革兰氏阳性和阴性菌我没有试验过，你可以试一下，反正只要不到20分钟的时间，很快的。 再补充一点，每一步的混匀最好是涡旋。

啊 这么好的方法啊 试试 谢谢了

这么简单啊，是什么原理呀

呵呵，楼主真聪明把试剂盒提取质粒的方法简化了，我想问下你的loading buffer是自己配的，还是用试剂盒里面的？

loading buffer可以自己配，也可以用买内切酶时附带的。
原理其实很简单就是利用苯酚：氯仿：异戊醇的裂解和抽提作用，裂解菌液和抽提质粒同时进行。
还有一点，这种方法跑电泳时，还有一条基因组的条带。

溶液1指的是什么溶液

不是通常说的裂解液1吧，那个又没有破裂细菌的作用。。。

就是通常的溶液1啊，我上面已经说了裂解细胞的是苯酚：氯仿：异戊醇了。