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[免疫学实验技术] 【求助】把酶加到显色剂中A和B中,为什么在A中酶活性掉得比较慢,但是在B中就掉得很快,是什么原因呢?

本主题由 人人为我 于 08-3-20 16:42 分类 
武林三国

【求助】把酶加到显色剂中A和B中,为什么在A中酶活性掉得比较慢,但是在B中就掉得很快,是什么原因呢?

把酶加到显色剂中A和B中,为什么在A中酶活性掉得比较慢,但是在B中就掉得很快,是什么原因呢?是成分里什么成分影响的呢?

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Re: 【求助】把酶加到显色剂中A和B中,为什么在A中酶活性掉得比较慢,但是在B中就掉得很快,是什么原因呢?

你加到显色剂A中之后,怎么验证酶的活性呢?

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武林三国

Re: 【求助】把酶加到显色剂中A和B中,为什么在A中酶活性掉得比较慢,但是在B中就掉得很快,是什么原因呢?

酶是用已经验证合格的酶了,现在就是要验证显色剂是不是合格的,当我把酶加到这两个中是发现加到B的掉得比较快。

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Re: 【求助】把酶加到显色剂中A和B中,为什么在A中酶活性掉得比较慢,但是在B中就掉得很快,是什么原因呢?

是稀释好的酶工作液还是原倍的酶?加进去放了多长时间?

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武林三国

Re: 【求助】把酶加到显色剂中A和B中,为什么在A中酶活性掉得比较慢,但是在B中就掉得很快,是什么原因呢?

稀释好的酶,放进去半个小时就掉了很多了

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不知道是不是ECL的显色剂?
我们所购买的HRP的显色试剂,不管是直接显色的还是曝光的,A液都是显色底物,但不是直接与HRP作用的,而是呈色/曝光的底物(DAB,TMB, Luminol等),它们的直接激活物是O2-;B液一般是过氧化氢,这才是HRP的直接底物。 整个HRP显色的过程是:过氧化氢被HRP催化放出O2-,然后作用于呈色/曝光底物,产生颜色/发光现象。由于过氧化氢性质不稳定,所以不能将它与显色/发光底物长时间保存一起,所以一般的Kit都是装成A、B两管。
这也就说明了楼主的情况? 要是我没误解的话。

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