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【求助】怎么样减少细胞传代时细胞死亡的问题?



【求助】怎么样减少细胞传代时细胞死亡的问题?

我在做L6大鼠骨骼肌细胞传代的时候,在每次传代结束后,发现细胞悬液中老是不干净,总是有一些黑色的颗粒状物质,按照时间推算,这个应该不能是微生物污染,同时在开始传代实验前,我已经认真的检查了培养基和胰蛋白酶溶液了,为了保险起见,我后来又单独做了培养基和蛋白酶的细菌培养实验,未发现有细菌等感染。因此,我猜想,这些黑色的碎片应该是死亡细胞分解的碎片。请教各位高手,我该怎么样避免这样的情况再次发生呢?谢谢~

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Re: 【求助】怎么样减少细胞传代时细胞死亡的问题?

悬液中有黑色颗粒状物质,微生物污染的可能性较大,如果不是特别严重,可以用氧氟沙星泡一下,还能够救过来。如果是细胞分解的碎片,可以离心去除

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Re: 【求助】怎么样减少细胞传代时细胞死亡的问题?

谢谢LS 的解释,但,这个不是污染啊!,我制备悬液后立即就分装了FLASK了,这么短的时间内就算有感染的可能,也不会增殖的那么快啊!另外,可以排除培养液,胰蛋白酶液里污染的问题. 我是新人,很多地方不明白的~请多指教~

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Re: 【求助】怎么样减少细胞传代时细胞死亡的问题?

传代后,24小时黑点点还有么? 我有时候遇到的情况是刚传的时候有,24小时后就没了!! LZ,如果对细胞生长没影响的话可以不要管他的!

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Re: 【求助】怎么样减少细胞传代时细胞死亡的问题?

问题是,这个东西会导致细胞不贴壁的. 顺便问下,"我有时候遇到的情况是刚传的时候有,24小时后就没了",为什么24H后就没有了呢?给代谢了? 车斑竹,请赐教~~谢谢~~

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Re: 【求助】怎么样减少细胞传代时细胞死亡的问题?

附带说明下,那个黑色的物质不象是飘在培养基里的,象是贴壁的.也不是瓶子外边的脏东西.

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Re: 【求助】怎么样减少细胞传代时细胞死亡的问题?

按照Caterpillar的说法离心也去除不了吗?

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武林三国

Re: 【求助】怎么样减少细胞传代时细胞死亡的问题?

细胞碎片可以用离心驱除的啊~~

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