我现在要作RT-PCR，引物要怎么设计啊？
用Primer Premier 5.0和Oligo那个好啊
因为我是学化学的，希望各位前辈能说的浅显一点，拜托了，谢谢

PS：有什么关于基因工程的比较好的书籍么？

基因工程方面的书，基础首推《基因工程原理》，实验首推《分子克隆》 引物设计选用那个软件都可以，PP5入手快一些。 每个软件都会根据一种核酸序列分析和引物设计的方法和模型来计算设计引物，虽然很多软件的方法不同，但结果大多都是可用的。所以不用过于拘泥某种软件。 你可以看下手头有那个软件和那个软件的使用说明，就近即可。

我看过一篇文献，认为Primer Premier 5.0适合用来设计引物，Oligo适合用来评价。

楼主要先查到需要RT－PCR的基因序列，然后用软件来设计，其实我认为最快捷、安全有效的办法就是引用文献上的引物序列，然后去BLAST一下（因为我发现许多文献的引物根本就是有问题的，BLAST没有问题就应该很好。）

楼主可以参考一下帖子：

【分享】Primer Premier使用手册中文版－－教你如何使用软件设计引物 
                           www.genecool.com/bbs/21684/ShowPost.aspx
【原创】oligo使用图解 
                           www.genecool.com/bbs/26867/ShowPost.aspx 

    的确论坛内有很多不错的帖子是关于引物设计的，楼主可以先夺看看，有什么问题可以及时与大家讨论哈

我已经看了一些，不过现在还在入手阶段，遇到问题还会向各位斑竹求援的，谢谢