我的蛋白质是分泌表达的,本身就有信号肽,可是瞬时转染293细胞后没有分泌出来,而是在胞内裂解液中检测到！！  信号肽是不是有细胞特异性？

情况应该是这样的，就是因为瞬间表达量太大，所以在细胞内或细菌内聚集成包涵体形式了，就分泌不出来了。 可以调整表达条件，让表达正常化，慢慢表达，不要瞬间表达量太大，就能分泌出来了。 具体情况可能要参见相关的技术指导书中有关包涵体的章节。

动物细胞表达的蛋白质没有包涵体这么一说的，应该不是这个问题！ 我们实验室的一个博士后也遇到这样的问题！！

[quote user="車！！"]动物细胞表达的蛋白质没有包涵体这么一说的，应该不是这个问题！ 我们实验室的一个博士后也遇到这样的问题！！ [/quote]

年轻人，怎么没有证据的情况下就否定一切呢？
我说包涵体，只是借用，我说的是会不会有类似的情况。
就可能就要去尝试，理论上和实践上都要尝试，不能偏听偏信。
总是沿着既定的路走，那还怎么突破呢，呵呵：）

比如，因为瞬间表达量太大，激活了载体的某种自我保护途径，把你的表达蛋白的信号肽切除了，或者把表达蛋白以某种形式包裹了，或者是你表达的蛋白的高级结构中有一些特殊的结合方式，因为你的瞬间表达量太大，导致了这些结合方式错在表达蛋白之间进行了错误的结合（对于这个问题，你可以用蛋白结构预测软件预测一下看看）。
可能的问题很多啊，挨个试呗，呵呵：）
如果不想去认真研究他为什么，那就避开就行了，改变一下表达条件，调节一下瞬间表达量试试。

俺离开科研工作好多年了，纯粹是瞎掺合，说的不对的地方，不要笑话俺奥：）

关于信号肽问题，怎么确定在原核表达时需不需要信号肽哪？

呵呵 试验一下吧! 或多看点文献. 你的蛋白质是真核的还是原核的?/ 是分泌型蛋白质么? 原核和真核的信号肽不仅在结构上相似，而且在功能上也具有相似性。Talmage等(1980)发现，细菌的信号肽可以在真核细胞中发生作用，以后他们又发现真核的信号肽序列也能在原核细胞中起作用。这两种信号肽序列在切割位点上具有相似性，细菌的信号肽酶可以切除真核的信号肽。 成熟蛋白质内有与分泌相关的氨基酸序列：对于很多蛋白质来说，信号肽对其分泌是必需的，但仅有信号肽还不能完成分泌过程，很多在大肠杆菌中分泌的蛋白质需要其成熟体中的氨基酸序列来引导其到达最终的目的地。缺少这部分相应的氨基酸序列，分泌就不能正常进行，这已被基因融合和基因删除两方面的实验所证实。 细胞内的转运机制：和真核细胞一样，原核细胞内蛋白质的分泌也需要数种细胞内蛋白质的参与。目前已经发现了信号肽酶I、信号肽酶Ⅱ等近20种蛋白质参与了分泌过程。与真核细胞不同的是，在大肠杆菌中，蛋白质的合成和蛋白质的分泌过程有些是同步的，有些则采取了先翻译出蛋白质，然后再分泌出来的翻译后机制。而分泌的能量来源于高能磷酯键的水解或质子的推动力。 通过以上讨论可以看出，并非任何蛋白质都可以在大肠杆菌中得到分泌表达。这主要是由于受所表达的成熟蛋白质的氨基酸序列和构型的限制。由于原核生物和真核生物蛋白质的分泌机制十分相似，真核生物中的分泌蛋白大多能在大肠杆菌中得到很好的分泌表达。还有一些相对分子质量小的多肽也往往能得到分泌表达。但对原属真核细胞的非分泌蛋白，很难在大肠杆菌表达后再分泌到周间质，而最多只能结合到细胞内膜上。因此，欲在大肠杆菌中表达分泌型外源蛋白时，必须首先考虑目的蛋白被分泌的可能性。其次，要考虑到在应用分泌蛋白技术路线时，可能遇到目的蛋白的某些序列被信号肽酶错误识别，以致把目的蛋白切成碎片进而部分或大部分失去生物活性。因此，要慎用这一技术路线。

谢谢楼上斑竹的解答！最近看文献，才想到这个问题，是个大问题。。。。。。。这就是为什么别人做细菌肽是做突变株，而一般不用大肠杆菌的原因吧！