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» 【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
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【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
野百合的春天
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发表于 07-5-5 10:10
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【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
如题。懒,想一次解决两件事——扩菌和鉴定。
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kaige88
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发表于 07-5-5 19:34
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Re: 【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
可以哦,将菌落摇成菌液后加1ul的量PCR可以了!
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binbintt
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发表于 07-5-6 21:47
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Re: 【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
还有一个比较简便的方法,我以前一直这么用的。你可以事先准备一些从斜面剪断的牙签并灭菌同时灭一些超纯水备用;当你的转化菌长好之后,你可以用事先灭菌的牙签挑取一个菌落到装有10-20ul灭菌超纯水的EP管中,抖散摇匀;之后取其中1ul进行PCR鉴定,如果为你目的基因则可以直接摇菌扩大,这样不用等到摇菌之后再鉴定而白白浪费一天,也不用因为用挑取菌落来鉴定之后发现正确但又不能扩大!装有菌+水的EP管还可以在4度冰箱保存两天都有效.......希望对你实验有所帮助!
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野百合的春天
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发表于 07-5-7 23:46
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Re: 【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
多谢啦!俺这就试试。
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winy9951533
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发表于 07-5-8 10:31
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Re: 【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
牛!看来我也可以这么做啊!
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binbintt
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发表于 07-5-9 16:45
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Re: 【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
该方法我再做论文的时候一直都这么使用,如果大家用了有什么问题大家一起拿出来讨论阿
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纤夫
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发表于 07-5-12 12:16
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Re: 【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
谢谢binbintt ,我按你的方法做了两次,效果不错哈。
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binbintt
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发表于 07-5-12 16:36
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Re: 【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
呵呵哪里哪里,好用就好哈
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seavibrios
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发表于 07-5-16 18:09
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Re: 【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
一般挑取的菌落摇到6到8个小时,就可以取1ul菌液进行PCR鉴定,这样很快就可以知道结果了
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binbintt
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发表于 07-5-16 20:19
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Re: 【求助】菌落PCR改成菌液PCR行吗?怎么改?
还是我那个方法要快点的哦
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