胶体金标记技术路线的选择
1．包埋剂
根据抗原或标记底物性质决定包埋剂种类。蛋白类，推荐使用K4M；包埋后立即切片标记。外泌蛋白可选择spurr。可长期保存使用。细胞结构组分，如纤维素、b-1,3-葡聚糖、几丁质、多酚化合物等，可选择spurr。
2．胶体金体积
精细定位如病毒、细胞器定位等选用5 nm胶体金。细胞壁组分采用15-20 nm胶体金。多标记时，胶体金直径推荐选用6 nm、10 nm、15 nm；稳定抗原采用较大颗粒胶体金。一般蛋白标记采用10 nm。
3．通用探针选择
IgG-gold：-20°C可保存1年；但定位时胶体金距离标记位点较远，不适于精细定位。
Protein A/G：-20°C可保存3个月；但定位时胶体金距离标记位点较近，适于精细定位和多标记。
Protein A和Protein G与不同抗体之间的亲和性
| 抗体来源 | IgG类型 | 与Protein A的亲和性 | 与Protein G的亲和性 |
| 人 | IgG(正常) | ++++ | ++++ |
| IgG1 | ++++ | ++++ |
| IgG2 | ++++ | ++++ |
| IgG3 | － | ++++ |
| IgG4 | ++++ | ++++ |
| 小鼠(mouse) | IgG1 | + | ++++ |
| IgG2a | ++++ | ++++ |
| IgG2b | +++ | +++ |
| IgG3 | ++ | +++ |
| 大鼠(rat) | IgG1 | － | + |
| IgG2a | － | ++++ |
| IgG2b | － | ++++ |
| IgG2c | + | ++ |
| 山羊(goat) | IgG | － | ++ |
| 绵羊(sheep) | IgG | －／+ | ++ |
| 家兔 | IgG | ++++ | +++ |
| 狗 | IgG | ++++ | ++++ |
| 猪 | IgG | +++ | +++ |
| 鸡 | IgG | － | + |
| 马 | IgG | ++ | ++++ |
| 豚鼠(guinea-pig) | IgG | ++++ | ++ |
| 仓鼠(hamster) | IgG | + | ++ |
| 猫 | IgG | ++++ | － |
| 小牛 | IgG | ++ | ++++ |
