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[免疫学实验技术] 【分享】免疫微粒技术

本主题由 人人为我 于 08-3-20 16:45 分类 

【分享】免疫微粒技术

                              免疫微粒技术
免疫微粒技术是利用高分子材料合成一定粒度大小的固相微粒作
 磁性微粒结合并分离O-157为载体,包被上具有特异性亲和力的各种免疫活性物质(抗原或抗体),使其致敏为免疫微粒,用于免疫学及其他生物学检测与分离的一项技术。作为载体的微粒通常是以某种高分子有机单体为原料,经过乳液聚合、悬浮聚合及辐照聚合等高分子聚合方法制备而成。由于制备材料及工艺不同,微粒的种类繁多,现已制成惰性微粒如聚苯乙烯胶乳微粒、活性微粒如羧化聚苯乙烯微粒、磁性微粒及标记微粒(用同位素、荧光素或酶标记)等四大类微粒,数量多达几十种。将制备好的微粒与抗原(或抗体)经物理吸附、化学偶联及生物素亲合亲桥联法等致敏方法形成免疫微粒。广泛应用于各种可溶性大分子物质的检测、分离与纯化、细胞标记与识别等。近年来,微粒技术在核酸分子杂交、DNA与RNA的分离及PCR等研究领域亦显示出广阔的应用前景。
一、胶乳微粒免疫检测技术
 
胶乳微粒
胶乳微粒免疫检测技术是在胶乳凝集定性试验基础上发展建立的-种非放射性均相免疫测定法,可以对各种微量的抗原物质和小分子半抗原(加药物、团体激素等)进行精确的定量测定。根据特异性抗体致敏的胶乳微粒(一般为直径约1μm的聚苯乙烯胶乳),与待测标本中的相应抗原相遇时发生凝集反应,胶乳凝集程度与被测物的浓度呈函数关系,由此可测出标本中待测物的含量。测定方法主要有粒子计数法和浊度法两种。
 
二、 免疫磁性微粒分离与纯化技术
 
磁性微粒分离细胞
磁性微粒(magnetic microspheres, MMS) 是80年代初,用高分子材料和金属离子为原料,聚合而成的一种以金属离子为核心,外层均匀地包裹高分子聚合体的固相微粒。在液相中,受外加磁场的吸引作用,MMS可快速沉降而自行分离,无需进行离心沉淀。因此,将MMS应用于免疫检测,可使操作过程大为简化。经过特异性抗体包被制成免疫MMS,与检样中的抗原结合形成免疫MMS-靶分子(或靶细胞)复合体,通过外加磁场的作用即可与其他成分分离开来。再以适当方式使复合体解离,在磁场吸引下除去游离的免疫MMS,即可获得纯化的靶分子或细胞。


 
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