pET-32a(+)质粒图谱及相关信息

图谱库ID：G0311

质粒名称：pET-32a (+)

载体类型：Bacterial

载体抗性：Ampicillin

培养条件：Grow in standard E. coli @ 37C

pET-32a (+)图谱：

 

特征序列区:

f1_origin		5872 - 5566
AmpR_promoter		5372 - 5344
Ampicillin		5302 - 4442
pBR322_origin		4287 - 3668
pGEX_3_primer		3269 - 3247
ROP		3062 - 3253
tet(852-576)		2587 - 2312
pBRrevBam_primer		887 - 868
lacI		1162 - 2253
lacO		762 - 735
T7_promoter		780 - 762
tet(564-300)		1079 - 816
EK		230 - 219
Orf0		1294 - 2253
T7_terminator		129 - 1
T7_Terminal_primer		69 - 87
Orf1		5302 - 4442
T7_transl_en_RBS		717 - 701
Orf2		327 - 1421

 

我现在在学校做毕业课题，是关于肉鸡干扰素a的，我用的基因模板是 NCBI 中 X92476，载体用的温控PBV220 ，原核表达方式，结果很不理想，我想换载体，不知道pET-32a(+)可不可以，我是本科生，菜鸟一个 ，希望版主帮忙，如果能馈赠PBV220或者pET-32a(+)，很是感激，一定重谢！希望能和您电话联系！我的信箱是：samgm@163.com

         PET32a的作用比较明显吧，不过针对不同的基因还是有差别的，问一下在PBV220里面不理想，是哪方面不理想，表达量不好，还是其他什么方面的？现在手头有哪些原核表达载体？根据不同的问题可以选择不同的载体。

您可以到http://www.genecool.com/bbs/29/ShowForum.aspx看看有没有有所需的质粒，有的话您就有必要好好看看这个帖子http://www.genecool.com/bbs/1259/ShowPost.aspx

祝您毕业课题顺利过关！！～～

pET32a是与什么酶共表达?请问用该载体表达真核基因时有什么需要注意的吗?
2 {: e) O! Z3 ]4 \" X  w9 l
& I- r6 I- C8 }4 ^4 E还有碱裂解法提取质里粒跑琼脂糖凝胶电泳得到的三条带分别是什么? 超螺旋......?
0 H" G/ U9 J0 R: b* E% [谢谢!

pET-32a-c(+)和这种pET-32a（+）是一种载体么？如果不是，那我以后要做蛋白纯化用这两种载体哪个好一些?
# X- i' Z' A2 F9 |* T" p补充：我现在用的引物是按照pMD18-T来设计的，让别人帮我看了一下，说引物上没有设计酶切位点，我最终想做的是蛋白表达和纯化。以下是我要用的pMD18-T的相关信息：
: Q, o! }3 L$ b

pET-32a-c(+)是3种质粒的总称：pET-32a（+），pET-32b（+），pET-32c（+），3个一不同的方式读码。

现在我是从细菌里面提取pet-32a，然后再用于连接、表达，但是提取效果一直不好，是不是和质粒特点有关系阿？这种质粒是不是多拷贝的阿？我当时用5ml菌液提取的。

偶然用到pET-32a(+)质粒的图谱，顺便贴上来了，是Novagen公司原版的。

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要是有序列就好了