Re: 【求助】 双基因表达载体
双基因表达载体是指通过添加第二个核糖体结合位点从而实现两个基因共同表达的载体。
常见的双表达真核载体是将IRES(核糖体进入位点)序列添加于CMV启动子下游的多克隆位点(MCS)后,并在IRES后加入第2个MCS,这样,分别通过两个MCS插入外源基因,即可分别通过CMV和IRES实现两个基因的共同表达。
与传统的将两个基因串联的融合表达,或者用linker连接两个片段用一个CMV启动子进行表达相比,IRES介导的共表达的第2个蛋白可有效折叠,不会受到第一个目的蛋白的影响。在一些利用荧光或者抗生素作为第2个基因共表达进行筛选的系统里面,IRES介导的筛选标记是不会受到折叠以及其他因素影响的。但目前基于IRES的双表达载体的IRES与CMV起始的基因表达效率是有差别的。