前面的就不写了,就从今天开始吧!
今天感觉还比较高兴,上午开完组会下来看了看昨晚连接转化的平板,发现上面长了好多,已经做这个已经一个多星期了,从来没有看它长过点,开始以为是连接片断或者载体回收时出了问题,跑胶看了明明还在,然后又换了酶,还是没有,接着加大了连接片断浓度,依旧看不到,都快绝望了,老板还在不停地催,可是实在是找不到原因!昨晚一咬牙把所有东西全部换成新的,虽然搞到好晚,虽然不知道连没连进去,但至少是有所进步了,成功的希望也大增!
下午把板子拿了出来放四度冰箱里,晚上挑点摇试管,用的蓝白斑筛选,蓝点很多,但是里面白点还是不少的,多挑了几管,提高点几率吧,明天跑TAE鉴定再说,应该问题不大的!上回那个片断只长了两个点,一个蓝的一个白的,结果把白的摇起来还真对了,所以运气还是不错的!
又把发酵液取了几个样,要做什么动态曲线,感觉颜色怪怪的,希望不要出问题才好!过几天又得HPLC了,一大批样估计得熬夜了!
晚上pcr了三管,跑电泳看结果时有点吐血,三管一摸一样得东西,跑出了三个结果,自己的条带还是没有,尽是一些小条带,看来还得提高温度。把酶切好回收后的产品以及载体跑电泳看了一下,效果不错,接下来顺手连接了,明天再做转化吧,呵呵,今天还算比较顺利了,希望好运气继续!
明天周五啦,快圣诞了。后天踢球聚会,放松一下神经,一切都会好起来的!