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【分享】RACE技术

本主题由 System 于 08-6-2 05:00 解除限时高亮 

【分享】RACE技术

      RACE(rapid-amplification ofcDNA ends)是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术,

通过PCR技术实现的,无须建立cDNA文库,可以在很短的时间内获得有利用价值的

信息.一般分5-和3-RACE两种.3-RACE较简单,首先将mRNA或总RNA 用PolyT引物反转

录,根据一般基因具有polyA尾巴的特点,选用特异引物(根据已知序列设计)和PolyT引物

PCR即可.大多实验者反映一次PCR可以搞定.5-RACE相对较难,目前流行几种5-RACE.

其一为加接头(传统),根据接头引物和自己设计特异引物PCR,可以设计巢式PCR二次扩

增.另外,有利用反向PCR技术,连接成环在PCR.还有,GENE公司一种smart RACE PCR,利

用反转酶末断加C特点,直接加上多G接头,转换模板而无需用连接酶加接头.下面附带

一些RACE文献,希望大家继续补充!
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Re: RACE技术

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Re: RACE技术

大家学习啊

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楼主辛苦了!赞一个!
 
不过看起来有点累,能在word排下版就更好了。^_^
 

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Re: 【分享】RACE技术

好的!

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Re: 【分享】RACE技术

学习ing...

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Re: 【分享】RACE技术

[quote user="kaige88"]好的![/quote]
 
 ^_^

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Re: 【分享】RACE技术

invitrogen的5' RACE的方法比较有趣,不是传统的末端加A而改成了末端加C。 自己设计引物,参考公司的锚定引物自己购买其他的试剂要比直接购买试剂盒要便宜许多。我曾采用购自Takara的全套试剂,效果也很好。只不过用于3'RACE的RNA末端加A的RNA聚合酶不再对国内销售了,如果购买需按国际价格,一下子价格增加了5倍。
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  • kaige88 威望 +1 精彩解答 07-11-27 10:03

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Re: 【分享】RACE技术

同意Jack 版主、专家委员会委员看法!

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