为什么在表达一个蛋白的时候要先把目的基因转到克隆载体中再转到表达载体中使其表达?直接转到表达载体中不可以吗?

有的载体是专门设计的表达载体。而有的载体是设计用于克隆的载体。通常，用于克隆的载体，转化效率更高，质粒复制质量更高，也更利于保存。而表达载体，则设定了表达控制的元件，可以最大程度上避免外源蛋白表达带来的对宿主的毒性。而在克隆载体中，通常是没有表达元件的，外源蛋白在其中无法表达。
如果有兴趣，可以多看看PET操作手册。

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谢谢你的解答。

很受启发！ 谢谢！

我也有这样的疑惑，可是我还是没太看懂路漫漫学长的解释。
是不是这样的意思，先将目的基因连到克隆载体的目的是为了增加目的基因的拷贝数，然后再将其放入表达载体表达

可以这么理解。
你要是很有把握，可以不链接到克隆载体。直接连到表达载体，我这么做过，时间很快，3天就可以构建完成。
只是很多方面都需要考虑，包括设计引物的酶切位点的保护碱基个数、实验风险等，万一连接不上。。。。你又得重新克隆了，呵呵

其实也是一样的,不过TA克隆载体之类的可以更快的得到片断

哦，原来是这样的啊！Robinho的解释真是风趣啊，不过总算让我明白了 也感谢版主kay0205，谢谢genecool。

克隆载体一般用于克隆序列未知的基因，序列都不知道，无法直接做表达，一般只有做TA克隆或平末端克隆，测序后才好设计表达策略
已知基因克隆表达大可不必连克隆载体，费时费料

恩，谢谢超级版主nano更为深刻的解释