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[PCR资源共享] 一种DNA 侧翼序列分离技术———TAIL-PCR



一种DNA 侧翼序列分离技术———TAIL-PCR

摘 要:在分子生物学研究中,基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知DNA
序列邻近的未知序列,热不对称交错PCR(简称TAIL2PCR) 反应技术能够较好地解决上述难
题。该技术通过3 个嵌套的特异性引物分别和简并引物组合进行连续的PCR 循环,利用不同
的退火温度选择性地扩增目标片段,所获得的片段可以直接用做探针标记和测序模板。
TAIL2PCR 技术简单易行,反应高效灵敏,产物的特异性高,重复性好,能够在较短的时间内获
得目标片段,已经成为分子生物学研究中的一种实用技术。笔者综述了TAIL2PCR 反应的原
理、引物设计、反应条件设置及产物分析。
关键词:热不对称交错PCR ;特异性引物;简并引物;侧翼序列分离
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