原来构建的pGEX-4T-1转BL21做表达有目的条带，并且表达量很大
中间其他实验耽搁隔了两三个月现在再做表达，一样的IPTG浓度（没有失效），一样的菌体浓度一样的温度却不表达了，该怎么办？
谢谢各位大侠了，我实在是没办法了，这次被卡住半个月了，重新转化了质粒，重新尝试了不同的诱导浓度，依然看不到条带，谢谢各位了！

几年前实验室也有人出现过这个情况，没有完全解决
给你的建议是，重新转化，转化后每一次都不要培养时间过长，培养基内补加0.5-1%葡萄糖，不要保存诱导过的菌，还可以把培养基中胰化蛋白胨改成酸解酪蛋白，先试试，不行再说

这样的事情总做试验的基本上都遇到过，比较棘手！
基本上只能重复和摸索条件！
转化之前保证质粒和菌株的正确性，这是最重要的一点！不知道你保存的菌种验证过吗？质粒有丢失吗？

在表达菌株里面质粒很容易丢失的。你的估计是质粒丢失了。只能是重新做转化，重新表达了。

问一下，如果质粒上又抗kana基因，培养后加kana菌还能生长，但是提不出质粒来，那是怎么回事，是质粒丢失还是质粒没有提好呀

我也出现你们的问题，我接手师姐的课题，但是现在的菌种诱导后目的条带没有以前那也明显了，你们要是解决了就给告诉我一下 信箱caiyangliu_2007@126.com