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[其他] 求助:载体双酶切切散了



求助:载体双酶切切散了

最近在构建2个载体,需要进行双酶切,是BamHI和 EcoRI,两者之间仅差一个碱基,我酶切过夜结果切散掉了,另外一个构建好了的融合载体切了同样的时间居然没切开,跑电泳看不到切开的目的条带(100bp左右),这是为什么呢?
一定要坚持

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切散了一般是体系没做对或质粒不纯
看不到100的带很可能是因为量不够或下面RNA屏蔽了目的带

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