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[蛋白质纯化与鉴定]
为什么溴酚蓝跑出板底后蛋白质还在浓缩胶里
chenzhengzheng
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发表于 08-8-7 12:38
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为什么溴酚蓝跑出板底后蛋白质还在浓缩胶里
为什么溴酚蓝跑出板底后蛋白质还在浓缩胶里?????
望高手指教!!11
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溴酚蓝
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Robinho
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发表于 08-8-7 12:54
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样品的问题吧,是不是不容物太多把胶孔堵住了
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chenzhengzheng
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发表于 08-8-7 12:59
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跑完后 染色,在浓缩胶里出现了 分离的蛋白质条带郁闷.......我的外槽缓冲液加的很多和内槽连通了 会不会是这个问题~~~~~~~~
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Robinho
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发表于 08-8-7 14:21
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哦
不会连通吧, 那溴芬兰怎么也会跑出去,还是不是跑出去是扩散掉了?
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chenzhengzheng
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发表于 08-8-7 14:31
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确实是跑出去了 跑了8个小时.......恒流25mA ,电压在40V左右 电压在120V, 用MINI型电泳槽 ~~~~
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chenzhengzheng
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发表于 08-8-7 14:33
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上面打错了 是 刚开始电压在40V左右, 跑了4个小时后稳定在120V了~~
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Robinho
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发表于 08-8-7 14:38
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回复 6# 的帖子
跑电泳为什么用恒流, 这个电压是因为蛋白跑不动,溴芬兰小分子可以跑
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chenzhengzheng
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发表于 08-8-7 14:42
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我做的小麦高分子谷蛋白,查阅的文献都是恒流跑....所以.......
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nano
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发表于 08-8-7 19:59
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内外槽缓冲液连通等于你电泳槽里跑了个并联电泳,样品朝两个方向跑,浓缩胶里有点带就正常了
电泳用恒压或恒流都可以,不过恒流是加速跑,跑到后面可能会电压过大产生拖带,不推荐
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Robinho
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发表于 08-8-8 10:58
只看该作者
长知识了
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