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[其它PCR疑难问题] 请教分段PCR后产物连接的问题


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1# 大 中 小 发表于 08-8-1 19:56  只看该作者

请教分段PCR后产物连接的问题

本人需克隆6kb左右的目的序列至真核表达载体上，新手一个，问题多多，特向各位请教
1、分段PCR貌似可以通过限制性酶切位点或重组PCR将产物连起来，用那种方法较好呢？
2、如此大的序列连接到载体难度很大吗？
3、请推荐几个好用的真核表达质粒

谢谢～

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2# 大 中 小 发表于 08-8-6 21:10  只看该作者
1.可以重组PCR连接，也可以在序列中找酶切位点来连接，前者只要你试验设计得当一般都能成功，后者是否可行看你的序列，你找不到合适的酶切位点也拿他没办法
2.用酶切位点连的话就无所谓了，重组PCR的话有点难度，考验技能和设计，祝你好运
3.这个看你的目的了，不好说啊
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  • tieniu03 威望 +1 经验之谈 08-8-7 20:40

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