帮我设计一下ELISA!

我现在有三组小鼠，每组６只。共五次免疫（核酸免疫）。一直没做ELISA。现在想一起做。我以前没做过，所以不会设计实验。请各位帮帮忙。
　１.如何确定抗原浓度？
　　　可以用棋盘滴定法。但问题是，如何设计？
　　　方法一：先用包被液将抗原作一系列稀释(1:50～l:800)后，按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照)，保温，洗涤。加工作浓度酶标抗体，洗涤，加底物显色，加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值；为0．8左右，阴性参考血清A值<0．1的包被抗原稀释度为工作浓度。
　　　　请问：所得包被抗原工作浓度可以确定了吗？以后２，３，４，５都可以用这个工作浓度？
　方法二：先用包被液将抗原作一系列稀释(1:50～l:800)后，按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液稀释的不同梯度（１：２０～１：１００）的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照)，保温，洗涤。加工作浓度酶标抗体，洗涤，加底物显色，加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值；为0．8左右，阴性参考血清A值<0．1的包被抗原稀释度为工作浓度。

　如果哪位能帮我设计实验，我将万份感激！
　E-mail:qgle@yahoo.cn