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[求助] 请求帮助，如何构建一个真核载体

本主题由 gene℃ 于 08-7-23 08:16 移动 
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1# 大 中 小 发表于 08-7-22 22:44  只看该作者

请求帮助，如何构建一个真核载体

新手，请求帮助，如何构建一个真核载体，大体的思路，如何把TBPA基因连接到真核载体的大体思路，谢谢

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2# 大 中 小 发表于 08-8-22 10:58  只看该作者
构建一个真核载体
首先要有克隆操作用到的原件：原核筛选标记（如氨苄或卡纳抗性标记）还要有复制原点如puc ori,这一部分一般可以使用一个原核克隆载体就行了（把真核表达需要的原件克隆到该载体上去）

真核表达需要的原件
真核筛选标记（如neo等）可以到一些真核载体上去克隆
真核表达载体中每一个基因（包括抗性基因）编码序列都必须加上5‘启动子序列和3’加尾信号，这些序列一般使用病毒和一些管家基因的启动子、加尾信号序列，也可以到有关载体上克隆得到

我觉得构建载体就像搭积木，把所需要的原件组合好就行了，骨架序列的作用本人不清楚，请高手指导
这才叫个性

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