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求助:原代细胞转染方法



求助:原代细胞转染方法

各位大侠,我想用质粒载体(非病毒的)转染一种原代的包皮细胞,不知用哪种转染方法好,如果用试剂,请问用哪种试剂好,转染率怎么样?
谢谢!!!

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原代细胞的非病毒转染本来就是比较困难的事情。同时原代培养的细胞也有dividing and nondividing之分。
对原代培养的细胞,可以采用一下方法:
1. 非病毒载体,选择比较好的转染试剂,推荐QIAGEN的superfect转染试剂,对原代细胞还可以。
2. 采用电转。理论上任何细胞都可以通过电转,不足之处:需要电转仪器,缓冲液非常有讲究,不同细胞条件要自己摸索,细胞电转后,状态很不好。
3. 磷酸钙共沉淀,试试看吧。
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  • 小宝 威望 +1 精彩解答 08-7-28 07:13

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