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转染


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1# 大 中 小 发表于 08-7-18 10:45  只看该作者

转染

我做转染时，用的是LIPEFECTAMINE 2000，转染NIH 3T3，网上说这种转染试剂效率还可以，这种细胞也是常用的转染细胞株，为什么我的转染效率还不到1%？我都是按说明书上做的，我是将质粒转入 lipefectamine 2000的，用枪吹打数次，再用食指轻轻敲EP管底部混匀的。不知道是否正确？大家都是怎么做的呀？

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点击打开/关闭lvweiying2003详细信息
2# 大 中 小 发表于 08-7-20 19:39  只看该作者

回复 1# 的帖子

可能是1.试剂和质粒的比例不合适
      2.细胞状态不好
      3.质粒纯度不够

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点击打开/关闭yidingxing详细信息
3# 大 中 小 发表于 08-7-24 23:48  只看该作者
应该不是混匀的问题,正如楼上所说的.
建议你一个个问题排除,就找到原因了.
静候佳音

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4# 大 中 小 发表于 08-7-29 14:46  只看该作者
现在换了VIgoFect的转染试剂，瞬间转染还是效率很底，已经在用G418筛选，准备做稳定转染了。质粒也是去过内毒素的，虽然没有在超净台里提，应该问题不大吧。细胞状态可能是不大好，先稳定筛筛。

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5# 大 中 小 发表于 08-7-30 08:10  只看该作者

回复 4# 的帖子

祝楼主实验顺利！
生命诚可贵，实验价更高。

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