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[核酸提取] 求助!请对dna提取有经验者帮忙!



求助!请对dna提取有经验者帮忙!

提取龙爪槐DNA不成功,电泳无条带,做了3次都失败了,很苦恼
不知道什么原因请大家提供可能的原因
用的是ctab法:液氮研磨+pvp+ctab+p c i+c i+乙醇洗涤+te溶解

谢谢!!

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回复 1# 的帖子

能说的具体点吗?我用CTAB法提取过苹果的DNA,效果还不错!看能否交流一下。

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回复 2# 的帖子

好的
1)0.1g幼叶加液氮研磨,续加液氮一共4次吧,研磨产物转移至1.5ml离心管。
2)加pvp700ul,13000rpm,15min,去上清。
3)沉淀加入700ulctab提取液,60°水浴40min
3)加酚氯仿异戊醇,静置抽提30min,接着13000rpm,15min
4)取上清至新管,加700ul氯仿异戊醇,13000rpm,15min
5)上清转移至新管,加-20°预冷的异丙醇,翻转几次后13000rpm,15min
6)弃上清,用70%乙醇洗涤
7)rt干燥,加1mlte溶解

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回复 3# 的帖子

整个流程没有问题,有两点:一个是样品偏少;二是最后用TE溶解没有必要加那么多吧。给你我的方法试一试吧。见附件!希望有所帮助。
另外,附上常见问题及注意事项,希望有所帮助。

[ 本帖最后由 rkrl001 于 08-7-17 19:45 编辑 ]
附件: 您所在的用户组无法下载或查看附件
本帖最近评分记录
  • 纤夫 威望 +1 积极应助 08-7-18 08:50

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回复 4# 的帖子

好,谢谢你的建议!
我试试!

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回复 4# 的帖子

谢谢你呵呵
我提出来了,这次用了0.3g叶片+300ulte
另,附件里的东西很有用!3q!

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标题 作者 最后发表
救命啊 huaer 2007-07-18
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