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[微生物与分子生物] 大肠杆菌S17-1???



大肠杆菌S17-1???

是不是所有被署名S17-1的大肠杆菌不是一致的呢??我实验室要用的是S17-1 lambda pir 做双亲接合用,但是一直在最后的转化环节卡壳,总是无法得到转化产物 没有白斑!因此,我怀疑是菌株出问题了,这个菌现在能够在LB、 LB+KM、 LB+IPTG+X-Gal上都能生长??是不是它有可能含有质粒,质粒上又携带了别的抗性呢??我该怎么进一步确定呢??
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我是新来的, !希望版主以及各位老师多多帮忙了!
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转化没问题吧?感受态效率如何?
还可能菌株有问题,要不要换一个可靠的菌株试试。

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回复 1# 的帖子

  转化总是不成功啊!!我也很着急,或许是感受态的问题吧!
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转化子为什么要用蓝白斑筛选呢?? 为什么不用抗性筛??
如果一定要用蓝白筛选,那这个S17-1的染色体上是不是只编码lacZ的C端? 如果它本身就带有完整的lacZ那就不可能筛出白斑啊。

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S17-1(λpir) :λpir recA thi pro hsdR M+ RP4:2-Tc:Mu:Km Tn7TprSmr; mobilizing strain for pUT/mini-Tn5 derivatives

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