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[其它PCR疑难问题] 如何测定烟草花叶病毒颗粒的个数



如何测定烟草花叶病毒颗粒的个数

各位高手,我现在想做烟草花叶病毒的实验,但实验前想知道实验样品中烟草花叶病毒TMV的个数。不知道该怎么测量,我查里些资料,好像可以测OD值计算核酸的含量,但只能推算出病毒的浓度(质量分数)。到底怎么才能测出病毒的个数呢。请大家帮帮忙。谢谢!!!

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几年前弄过一会这个病毒,依稀记得有文献说如果是纯化的病毒,可以测OD估算病毒浓度,你可以多查下文献
我想一般试验都只要求有个大致浓度即可,试验中就以各种稀释度为准,很少有用多少个病毒的。实在是要精确计数恐怕是要做qPCR

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回复 2# 的帖子

谢谢,我现在实验需要估算一下病毒的个数,不知TMV的平均分子量是多少

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这个可能没法说,因为要研究到每个病毒粒子含各结构蛋白拷贝数,没有详细查过,应该是还没有研究到这么清晰,而且RNA病毒变异大,这个无法准确
记忆中国内有人做过粗定量,以OD值测算病毒粒子个数浓度,比较粗放,但是有一定的借鉴性,这个文献相信不难查,期刊网内的。这类工作已经丢得太久了,记得不清楚了,不好意思
实际上在病毒学试验中常用的是计量病毒滴度,也就是效价,纯化一批样品测定其滴度后按稀释度做试验(有时候同样浓度但感染力差距很大),除非是一定要做精确的核酸试验,好像没有必要要计数,还不清楚这个病毒有没有空包粒子的问题,没研究过。如果你查文献试验需要用多少个病毒粒子这样做法,应该他的源头文献里就会有计数的方法

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我建议做绝对定量,核酸的。能准确的给出数量的,哈哈! QQ 629221449

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