四天前拿到了一管在-20℃冰箱里保存了8年的大肠杆菌菌种(甘油管),用来做重组质粒转化,但是没有结果,感受态细胞的制备本人做过不少次了,应该不会有问题,请教各位高手,是不是菌种存放太久导致细菌生命力低下

我觉得时间有点太长了吧，可能不行了，你可以先传代复苏下看看长不长了

你还未做对照就下结论说是感受态的问题是否有点冒失。
大肠杆菌理论上甘油菌倒是不能保存8年，但是不知道你是否能明确一定就是8年。
如果保存的菌种能够生长，做感受态以后没能有阳性。我可能不会先分析是感受态的问题。
你的菌保存这这么长时间，如果转化是要做对照的，即： 同种质粒转化不同感受态
                                                                                      （其中质粒和对照的感受态是要完全有效的，验证是否是感受态的问题）
不验证是不好说的，可能是菌株的问题、质粒的问题、操作方法的问题需要一一分析的

按道理说，复苏后能长出来，做感受态应该就可以用，但有些问题说不清，也可能是水平低了说不清楚吧
建议：做个转质粒的对照。或者复苏后传两代再来做试下

顶 我都是买的感受态
转化的效率非常高。

哈哈，-20不是才怪呢，哈哈，要么-70或者4就好啊，-20把细胞冻死了，