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[原核表达] 我的工程菌长得很慢



我的工程菌长得很慢

大侠好,我的目的产物,转化BL21(DE3)后长得慢,两种现象:
1、转化后在平板上(卡那抗性,并加2%的葡萄糖),24小时以后发现长得慢,个头比较小。
2、挑取菌落做诱导表达时长得也很慢,一般的工程菌大约2-3个小时就可以加IPTG了,而我的总是5、6个小时后才勉强到加IPTG(37度,200转摇床)。
说明:我的目标蛋白是有毒性的,会不会是毒性的原因啊?

请各位指点!谢谢!!

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可能就是毒性的原因。你可以在培养初期抑制一下目的蛋白的泄露表达,等菌浓度上去了,再诱导。就怕菌死了。
诱导条件也可以优化一下,比如适当降低IPTG浓度,降低诱导温度等等。

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