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[原核表达] 求助:factor xa 能不能水解变性蛋白?



求助:factor xa 能不能水解变性蛋白?

我的蛋白表达用的是pgex-3x载体, 目的蛋白以包涵体形式表达,用强酸(ph=2)能溶解包涵体
我现在想要做的是,先用盐酸溶解包涵体,再超滤离心浓缩,然后用缓冲液(factor xa酶切缓冲液)稀释
浓缩液,加factor xa酶水解去除GST融合标签!
           请问我这样做可行不?
           再就是我想问的是factor xa 能不能水解变性的蛋白? 是不是非要先将包涵体目的蛋白复性后才
可以用factor xa酶切去除融合标签。

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强酸(ph=2)会不会对你的目的蛋白以及Xa有破坏作用呢?
建议楼主还是把蛋白复性之后,用xa推荐的标准溶液,或者比较温和的溶液(例如PB)来做。
需要结合你的目的蛋白的特点,Xa的反应条件,以及目的蛋白纯化之后的用途来综合考虑。

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