扩增高GC含量模板的优化程序
相信有不少酷友都碰到过高GC含量的PCR模板带来的困难，前些时候，我就被一个含量为70％的真核生物启动子的克隆给难住了，主要的困难是这个启动子的局部局域GC含量高达90％以上，有连续的30个GC，使用不同浓度的DMSO，甜菜碱等添加剂都无法成功扩增。经过详细的研究，我找到了一篇专门研究高GC含量模板的扩增的文章，并采取了该文章使用的Slowdown PCR策略。此后，我又用该程序成功扩增了多个高GC含量的真核生物的启动子。我推荐那些需要扩增高GC含量模板的酷友好好研究一下这篇文章，特别是作者分析问题的思路和设计方法。可惜的是，这篇文章在国内的多个大学尝试后都无法下载，直到后来求助在Michgan大学读博士的同学后才得到这篇文章。因此在此提供这篇文章，以帮助需要的酷友。
[ 本帖最后由 Quifidelity 于 08-5-27 11:37 编辑 ]
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