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[原核表达] PCR引物设计时关于酶切位点及SD序列的困惑


武林三国

PCR引物设计时关于酶切位点及SD序列的困惑

通过PCR扩增一个完整的基因,该基因要用于后续的克隆表达,在设计PCR引物时所加的酶切位点是克隆载体没有而表达载体有吗?
    我要做的是原核表达,在引物设计的时候还要注意起始密码子前的SD序列,那设计时只需随机添加嘌呤即可,还是有一定的原则的呢?
    在设计用于表达基因的PCR产物时还需注意点什么呢?请各位多多指教,不胜感激!

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酶切位点是要克隆载体上没有而表达载体上要有的序列,还有你的目的片段上也不能有!
这条路不光通向成功!

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