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[其它PCR疑难问题] 质粒电泳后为什么比载体的条带还小???


武林三国
如上面所说,提取质粒电泳经常见到有2条或3条带,只得到超螺旋质粒是比较难得的,说明复性效果很好,当然,实际上并不是说你提到的全部是超螺旋状态,只是说比例相当高。并非如楼上所说跑时间长点就能见到,以MARK为证,跑开了看不见,再跑多久也看不见。以前提质粒的时候比较规矩,提出来的就只看得到超螺旋,现在做多了就马虎了,每次都两条带,也不在乎了,反正酶切后都是一个样
关于提质粒电泳带型的问题,你可以搜索论坛,以前有人写过很好的综述,这里不再累述

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呵呵,除了是超螺旋的质粒外,你的上样量是不是很大啊。浓度大的质粒荷电也多,跑的当然会快啦。你试下稀释质粒,上5微升再跑,结果又是不一样的。

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武林三国
胶浓度不同,结果也会相应的有区别,何况质粒电泳不好用marker做比较,如果跑的大小比实际的小,然后进一步做pcr或酶切来鉴定。
这条路不光通向成功!

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