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[功能研究]
做水稻的基因克隆和功能分析是否需要做RACE
lzk0207
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发表于 08-5-4 15:27
只看该作者
做水稻的基因克隆和功能分析是否需要做RACE
达人请回复:
谢谢
我在做一个水稻基因的图位克隆和功能分析,,,,大家知道水稻已经测序完成,,,是否有必要作3' 5'RACE?????/
很是困惑
请达人指教
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RACE
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kay0205
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发表于 08-5-5 07:47
只看该作者
如能在数据库里找到你的序列,一般不需要。
如果能在数据库里找到你的序列,并且引物设计的好的话,一般不需要。
RACE是用来扩增5,3末端的,当末端缺失时,在分离MRNA时会带来很大的麻烦,通常结果就是失败,所以在RACE出现前,只能通过反复筛选文库来获得全长,后RACE的出现改变了这个状况
所以,只要数据库里已有你的全长序列,就不需要RACE了,只需从头到尾设计引物就是了;顺便,注意下你要DNA全长还是CDS。
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纤夫
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08-5-5 10:48
亲爱的甘荻丽娜
我终将远行
风帆扬起,迷雾散尽
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daohuaxiangpiao
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发表于 08-6-14 15:51
只看该作者
我也遇到这个问题,并且买了一个3/race. 但觉得无用,我查许多图位克隆基因做功能时都是把基因连同上下游1500bp 全部转入突变体。包括了启动子和终止子。目前不知怎么预测终止子。哪位大虾帮我分析一下,看我的序列把启动子和终止子包括没有?
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