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[酵母] 新手求助:关于酵母表达系统的


武林三国

新手求助:关于酵母表达系统的

酵母转化后,要做PCR检测,操作手册上说用的是AOX的引物,用所转的基因的引物可不可以啊
还有做PCR检测应该怎么处理酵母比较好啊,据说不太容易检测,是不是啊?谢谢

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两种引物都可以,但是用通用引物比较好,因为可以减小污染带来的假阳性
提基因组后做PCR当然比较好,具体方法可以查文献看书,已经很成熟,不过一般直接P也可以(不保证一定成功)
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  • shiweiliu861 威望 +1 精彩解答,谢谢nano兄的支持! 08-5-6 18:48

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武林三国
用基因引物是可以的。因为酵母的细胞比较厚,直接作菌液pcr不容易出结果,最好先提取酵母基因组。这个方法往上可以搜索到。我比集美在身边,等以后把提取基因组的SOP给你补上。

最后一点,嘱咐你一句,酵母PCR鉴定有可能是假阳性,所以基因水平的鉴定结果不是很保险。一切都应该以表达水平的鉴定为准。可以是SDS电泳,也可以是酶活。

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