各位老师好:
我准备将两个基因连接起来进行表达,请问第一个基因序列结尾须加终止密码子吗?另外第二个基因序列的开始须加起始密码子吗?
请问起始密码子和终止密码子对表达的影响到得有多大?具我所知表达开始于载体的起始密码子,而终止于载体得终止子(非终止密码子),因为核糖体遇到终止子时才从mRNA上脱落下来,那么终止子的作用到底是干什么的呢?我都晕死了,哪位老师能告诉我么?

先回答你第一个问题，第一段序列末尾必须把终止密码子拿掉。第二个序列起始密码子加与不加都没什么，建议作融合pcr将两段序列融合到一起（设计融合pcr引物）。
在说第二个问题：表达的开始是在调控序列的作用下开始与启动子P，核糖体向下游移动同时将dsDNA解链，然后氨基酸过来参如核糖体，这样翻译成蛋白，核糖体的移动终止与终止子，而你目的蛋白的翻译则停止与你的终止密码子。

非常感谢老师的给我的答案!!!!!!!!!!!!!!!!谢谢谢谢

终止子位于DNA上，属于基因非编码区下游的核苷酸序列。它特殊的碱基排列顺序能够阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，从而使转录工作停止。

您说的融合PCR是不是就是重组PCR啊？

嗯，应该就是重组PCR，overlap pcr