1、突变是随机的……虽然有些序列会成为突变热点，但尚不清楚机制。DNA复制不是100%概率正确，紫外等致畸变物都可加大概率，但是质粒传代时候出现突变，然后再给你转化了挑中，基本是中六合彩的几率。一般是构建时不慎引入较多，又没有测序检验导致流毒无穷。你拿来的质粒，构建者的诱导记录有么……查一下……
2、症状一般是非期望的分子量的表达蛋白，因为终止子位置改变，但如果始终没有终止信号，或者要经过较长序列以后才有终止信号，也有可能根本检不出表达蛋白（核糖体随机从某位置掉落，没有固定分子量），但因为会消耗细菌大量能量和原料，导致自身蛋白含量下降。
3、解决办法：
1）如果突变位点非常多……，重头开始构建……
2）个别位点突变，在突变位点两侧使用5端磷酸化引物重新扩增整个载体+目的基因，平端连接后，测通表达基因部分，这时候：
Ⅰ 要求不太严谨的情况下，多挑几个克隆去诱导，诱导OK，PASS（载体部分可能有突变，但不影响表达，忽略）
Ⅱ 无法容忍载体可能的突变，则在测序范围内的两侧，寻找酶切位点，切下后再装进没PCR过的载体骨架。
具体选择何种策略……取决于需要消耗的时间……
但我还是提醒你，先把其他因素排除再说
，质粒序列先送去测，看情况如何再说。
