单克隆抗体制备之细胞融合的成败影响因素很多，大至培养箱，培养基，培养血清，融合剂，融合手法，小至ＨＴ，Ａ等都会对融合产生重要的影响，使你的融合失败。
但从你说的你上次融合，融合率也很低，应该现在整个系统有问题，没有你具体的实验过程与操作，情况，只凭你现在描述，很难断定是哪方面的原因。
有一点，应该不是老鼠的问题，免疫效价低，只影响融合后的阳性率，并不影响融合率。
关于离心转速，1200的转速没有问题的，不过，建议你融合前使用1000的转速，融合后的一次离心使用800的转速。
关于污染，如果是污染，那肯定是支原体污染，否则不用考虑污染。
力所能及的建议：
１. SP2/0复苏后８Ｎ培养筛选，但融后前一周一定用去８Ｎ血清培养基培养一周。
２. 培养血清：如果你使用的国产培养血清，那么你在融合前一定要进行筛选，目前国内血清质量还达不到任意拿来一个厂家，任意一个批次的血清进行细胞培养。否则你可以直接购买GBICO的胎牛血清，以保证你的融合不会在血清方面出问题。
3.融合剂也很重要，既使sigma的ＰＥＧ也不敢保证能百分百的融合成功。
４.融合手法，这一点楼主能保证吗？你对融合操作的成功率有多大？
说真的，楼主如果想解决问题，还要一个原因一个原因的 去排除。如果觉得麻烦的话，我可以提供你帮助。
我们是专业的抗体公司，具有丰富的单抗，多抗制备经验，提供抗体制备，抗体生产，抗体纯化，标记及ELISA Kit服务。并提供单克隆抗体的整套试剂：
培养血清：
Cat. No Name Size Ｐrice Ｎote
CCS01100 特级胎牛血清（defined FBS) 100ML ￥280.00 MAYBIO
CCS01500 特级胎牛血清（defined FBS) 500ML ￥1200.00 MAYBIO
CCS02100 标准胎牛血清（standard FBS) 100ML ￥250.00 MAYBIO
CCS02500 标准胎牛血清（standard FBS) 500ML ￥1050.00 MAYBIO
CCS03100 新生牛血清(newborn calf serum) 100ML ￥160.00 MAYBIO
CCS03500 新生牛血清(newborn calf serum) 500ML ￥720.00 MAYBIO
液体培养基：
Cat. No Name Size Ｐrice Note
CCM03500 DMEM 高糖 500ML 45.00 MAYBIO
（Ｌ-Glutamine and sodium pyruvate,HEPES)
CCM03500-FCS 20%FCS DMEM 高糖 500ML 100.00 MAYBIO
（Ｌ-Glutamine and sodium pyruvate ,HEPES)
CCM03500-FCSHT 20%FCS 1%HT DMEM 高糖 500ML 120.00 MAYBIO
（Ｌ-Glutamine and sodium pyruvate ,HEPES)
CCM03500-FCSHAT 20%FCS 1%HAT DMEM 高糖 500ML 120.00 MAYBIO
（Ｌ-Glutamine and sodium pyruvate ,HEPES)
融合剂：
Cat. No Name Size Ｐrice Note
CCF010.5 PEG1500 0.5ml/vial 150.00 MAYBIO
CCF021.0 50% PEG(ready-to-use) 1.0ml/ml 150.00 MAYBIO
其他：
Cat. No Name Size Ｐrice Note
CCF032.0 HT贮存液 ２ml 10.00 MAYBIO
CCF032.0 A贮存液 ２ml 10.00 MAYBIO
所有试剂都经过严格的质控，在整个融合系统中均采用我们的试剂，在培养箱与融合手法能够保证的情况下，在没有污染发生的情况下，融合率达到90%以上。
另我们提供单克隆抗体订制服务，抗体生产，纯化与标记服务。
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[ 本帖最后由 心尖上的冰 于 08-3-25 01:47 编辑 ]
