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[求助] 请教几个关于RNA的问题



请教几个关于RNA的问题

1、我用trizol法提的杨树叶子的总RNA,跑胶带型如图(泳道9),帮忙看看它们都是什么带,最上边的如果是28S的话,它的亮度是不是也不够,中间那条为什么那么宽,那么亮?是一条还是两条带?最下边的那条又是什么?
2、我用“纤维素吸附双链RNA检测植物病毒”的方法提取了好多病的杨树,部位是韧皮部,实验比较粗放,但都有带,我把这些所谓的双链RNA和Trizol法提的杨树叶子总RNA一块跑胶(胶是1.4的,20cm的电泳槽90伏跑了60分钟,加样8微升,电泳缓冲液是1倍的TAE),结果它们在相同的位置有带,它们是不是一种东西?这些带是双链还是单链的,这些带是不是病毒的东西呢?
3、单链RNA能不能被EB染色呢,在跑的总RNA的胶里看到的亮带是被EB染了的单链RNA,还是因为单链RNA自身折叠形成了高级结构而能够被EB染色?
4、哪位大侠能介绍一种鉴别一段未知的RNA序列是单链还是双链的方法吗?
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请问泳道9后面的是怎末回事?
是点的样还是?怎末条带不一样呢

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rna可以被eb染色啊,我们都是把eb加到上样缓冲液里面的.应该是有RNA提出来的,不过有的发生降解了,还有基因组FNA污染.

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回复 2# 的帖子

9后面不全是杨树,有其他树种,这张胶里大多都是杨树

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问题还没有解决啊

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电泳后的带是单链的,引物你制备样品和胶都加了甲醛,还有制备样品加热也是二级结构去除了
单链RNA能被EB染色
鉴别一段未知的RNA序列是单链还是双链的方法可以借鉴RNAi的想法试试加RNA酶。(个人观点)
阿巴贡

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