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[免疫学基础知识]
求助:细胞复苏之后一边生长一边死亡
本主题由 xiao.xiaopan 于 08-3-26 23:52 分类
ivetar
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发表于 08-3-5 12:47
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求助:细胞复苏之后一边生长一边死亡
我做禽流感H5N1的单抗,冻存的杂交瘤细胞复苏出来后一边生长一边死亡,活的细胞很少,天天给它换液还是老样子,也不是全死光,所以不舍得扔,但不知道该怎么养了。。。
恳请高手解答!
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永远的可爱
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发表于 08-3-17 09:18
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复苏时血清浓度适当调高一下,然后慢慢降到通常值
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xiao.xiaopan
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发表于 08-3-18 21:24
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谢谢楼上的~~~
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发表于 08-3-19 15:12
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可能是培养板有问题,建议换一块
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ivetar
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发表于 08-3-22 15:30
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谢谢大家!
可能是我太急了吧,我又复苏了一瓶,细胞还是长的很慢,一边长一边死。但是我经常换液,一开始隔了2,3个小时就换一次,后面就不用太频繁了, 1,2 天一次。慢慢的竟然长起来了,一个星期过去了,终于长的还不错!
这次的心得就是:刚复苏的细胞要多关心它,经常去看,勤换液。
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xiao.xiaopan
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发表于 08-3-22 15:36
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心尖上的冰
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发表于 08-3-22 22:56
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你是第一次复苏细胞吗?
细胞复苏后有一部分细胞死亡是很正常的,不用太担心。
如果为了保证复苏的成功率,使细胞生长更快更好,背景更干净,可以使用饲养细胞复苏。细胞生长一般五至七天才能达到一个对数生长期,所以刚开始,你会感觉细胞生长会比较慢,其实等达到细胞对数生长期,很快就会铺满培养皿。
没有必要2-3个小时那么频繁的换液,复苏第二天可以换一次液,第五天至对数生长期时换一次液。
恭喜你复苏成功。
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xiao.xiaopan
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08-3-24 21:51
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