利用巴斯德毕赤酵母表达外源蛋白的研究进展

摘要：随着基因工程技术的迅速发展，已有数百种外源蛋白利用巴斯德毕赤酵母表达系统获得了成功表达。本文综述了该表达系统的优点、系统的构成，外源基因转化该表达系统的方式及表达特点，阐述了该系统在生产外源蛋白上的广泛应用。并重点分析了影响外源蛋白在该表达系统中表达的因素及优化策略等。
关键词：巴斯德毕赤酵母；外源蛋白；基因；表达

    长期以来，大肠杆菌(Escherichia coli)一直被用作表达外源基因的宿主菌，而且已成功地表达了多种外源蛋白。但是这一系统本身也存在着若干缺陷：①缺少真核生物的蛋白翻译后修饰和加工，如剪切、糖基化、形成二硫键等；②表达的蛋白多以包涵体形式存在，需要经过复杂的复性才能恢复构象和活性；⑧背景杂蛋白很多，纯化较麻烦；(表达量一般不是很高。为了克服大肠杆菌表达系统的缺陷，1979年人们发展了酵母细胞表达系统。酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)因具有繁殖速度快，能高密度发酵，可以进行蛋白翻译后的修饰、加工等优点而成为最初发展起来的酵母表达系统；但此系统也有其局限性，如缺乏强有力的启动子、分泌效率差、表达菌株不够稳定、表达质粒易于丢失等。鉴于此，人们又发展了新一代的巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统。目前毕赤酵母表达系统在国内外已有非常广泛的应用，许多难于用其他系统表达的蛋白在这一系统中得到成功表达，且表达量较为可观。

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