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想得到更小的Ct值


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1# 大 中 小 发表于 08-1-24 04:48  只看该作者

想得到更小的Ct值

我的real time PCR有好几个标准曲线的Ct值都是在27-32之间，但是扩增效率很好，都接近100%。我想得到更小的Ct值，大约20左右吧。尝试用增加cDNA浓度来降低Ct值，但是发现效果并不明显，尽管cDNA增加了好几倍，但Ct值相差不大。希望哪位有什么好的建议能告诉我一下，怎么样才能减低Ct值。谢谢！

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2# 大 中 小 发表于 08-8-3 11:10  只看该作者
几倍当然是不够的，一般情况下是浓度相差10倍，ct值相差3.3左右
而且做标准曲线的话，不一定要用cDNA来做模板呀？可以回收目标产物，这样的话你就很容得到你想要的Ct值，我也是刚做，也有很多不懂的地方，估计您也做完了 呵呵
曲终人散尽，江上数峰请。

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