巴斯德毕赤酵母外源基因表达系统

    摘要 巴斯德毕赤酵母是目前最为成功的外源基因表达系统之一。有关研究主要涉及以下几个方面：宿主菌株、表达载体、转化方法、外源基因的整合与影响外源蛋白表达的因素等
    关键词 巴斯德毕赤酵母 外源基因 表达系统

    巴斯德毕赤酵母(Pichia pastori，Pp)表达系统是近几年来发展起来的较为完善的，被广泛用来表达外源蛋白的甲醇营养型酵母表达系统。
    该系统有许多优点：Pp的AOX1(乙醇氧化酶)启动子具有强诱导性和强启动性。适用于外源基因的高水平诱导表达；Pp作为真核表达系统，可对表达的蛋白进行加工和翻译后修饰。从而使表达出的蛋白具有生物活性；Pp中表达的糖蛋白的糖链长度为8～14个甘露糖，而酿酒酵母中表达的糖蛋白糖链中的甘露糖多达50～150个，且其分泌的糖蛋白的核心寡糖具有终端a-1，3糖苷联结，使其糖蛋白的抗原性明显增强，Pp分泌的糖蛋白糖基化位点与哺乳类细胞相同，免疫原性较低更利于临床应用；Pp生长快，营养要求低，所需的盐、微量元素、生物素和碳源都较易得到且廉价，具有强烈的好氧生长偏爱性。可高密度发酵，这均有利于工业放大生产；Pp中表达的蛋白既可存在细胞内，也可分泌到胞外，自身分泌的蛋白非常少，有利于分离和纯化。至今已有300多种外源蛋白在该系统中成功表达。许多蛋白的表达量可达到g/L以上水平。

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