CHO细胞无血清培养

1 实验材料
        CHO细胞株购于俄罗斯Soym Agromed，无血清培养基(CHO-S-sFM1I)购于Gibeo公司。

2 实验方法
        2.1 无血清培养基的配制
        用90ml纯水溶解制备1升量的袋装Gibeo CHO-S-sFM1I，加人2.45g NaHC03，用 1N NaOH将pH调为8.0，再用1N HC1调回至pH7.1，定容后用0.22μm滤器过滤除菌。
        2.2 CHO细胞的适应
        用含血清的常规培养基和无血清培养基1:1(v/v)悬浮细胞，接种量为3×105个/ml。在37℃，8％培养箱中培养，使细胞密度达5×105个/m1。然后用等体积的CHO-S-sFM1I 将细胞稀释到3x 105个/ml，继续培养，重复上述操作，直至血清浓度降为0.1％后，用完全无血清培养基培养到3×106个/ml。再以3×l05个/ml接种，传50代，至此完成适应工作。
        2.3 细胞计数参阅《组织培养技术4》的方法，用血球计数板计数。
        2.4 CHO细胞表达EPO水平应用MIT比色法测定。

领教！

请问各位好友：CHO细胞如何血清培养？谢谢！