禽流感病毒核蛋白基因在重组杆状病毒中的表达
禽流感病毒核蛋白基因在重组杆状病毒中的表达
摘要 利用RT-PCR方法成功地扩增了我国禽流感病毒分离株AöXingjiangö1ö96（H14N5）的核蛋白（NP）基因,其限制性内切酶图谱和核苷酸序列与鸭源的标准H14N5毒株几乎完全一致,与其它毒株则有较大差异,说明该鸡源分离株与鸭源毒株有非常近的亲缘关系。将NP基因定向克隆到杆状病毒转移载体pVL1393中,再与杆状病毒线性DNA（BAC2N2BlueDNA）共转染于Sf9昆虫细胞中,经过三次蚀斑筛选,获得重组病毒rB2。用其细胞表达产物裂解后作SDS-PAGE蛋白电泳、Western-blot和dot-ELISA,结果表明NP基因在杆状病毒系统中获得了表达。同时用表达产物作琼脂扩散试验,结果表明表达产物与现行标准禽流感琼扩抗原具有相同的生物学活性。
关键词 禽流感病毒 重组杆状病毒 核蛋白基因
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