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求助有关电击转化问题

本主题由 WANZHAN 于 08-1-10 17:35 移动 

求助有关电击转化问题

求助各位高手:
       我做电击转化(大肠杆菌)时,总是时好时坏,不知道是什么原因,我觉得应该跟涂皿无关,不清楚到底是什么原因,感受态的多少、在电击杯底部均匀与否,都注意了,实在想不清是什么原因了?请各位高手救救我了!

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时好时坏,就应该仔细留心一下自己的实验细节,看能不能找出不同的地方,加油!

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你的连接产物怎么处理?可能连接效率以及连接产物的处理对转化结果有一定影响。

时好时坏是怎么比较的呢?每次都采用空载体做阳性对照的比较结果么?
如何在论坛上快速有效的提问获得帮助
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信念:有贴必回,言之有物!

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上传一篇关于电转化的文章(毕赤酵母),也许会有帮助!
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很好

非常感谢,我顶!

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回复 1# 的帖子

1 你在制作电转化的感受态细胞的时候是否注意你选用的水了,电转化对水的要求比较高——一定要用超纯水,而且超纯水在制备一个星期之后就失去超纯水的意义了,不能再用了!感受态细胞的浓度,以及感受态细胞的生长期!
2 电击杯是否彻底清洗干净呢??在清洗电击杯的环节一定要把乙醇 除净,所以千万不能急于求成!
3 电击之后立即加入恢复培养基,最好先抽取一部分,用恢复培养基多次涮洗电击杯,以保证你的转化产物最小程度的遗留!
4 恢复培养的产物最好全涂板!
让现在的行动具有将来的意义!

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转化农杆菌后挑斑摇菌一般需要几个小时 doctorcas 2007-07-21
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