抗伴放线放线杆菌IgY的制备及抑菌试验研究
吴东风 聂荣庆 唐宁 张进 文珠 胡国柱
目的:观察伴放线放线杆菌诱导母鸡产生特异性igY抗体情况,以及其抑制伴放线放线杆菌(A.n)和牙龈二氧化碳噬纤维菌(c g)生长效果。
方法:应用免疫接种法、水稀释法、盐析法、液体培养抑菌法、以及 ELISA法,诱导、提取和纯化 IgY抗体,取一定量抗体与细菌共同培养,测定抑制伴放线放线杆菌和牙龈二氧化碳噬纤维菌生长效果。
结果:两步硫酸铵盐析沉淀的IgY抗体纯度达85.6% ~90.3%;抗原结合效价为 1:32 000 ;抗伴放线放线杆菌 IgY抗体与牙龈二氧化碳噬纤维菌交叉免疫反应的抗原结合效价为 l:8 000 ;当抗伴放线放线杆菌 IgY抗体浓度在 5.0、1.0、0.1 时。细菌浓度在5×10。CFU/L培养24 h其抑菌率分别为 31.50%(P=0.0O4)、10.24%(P=0.024)、一3.30%,培养 7h其抑菌率分别为64.20%(P=0.004)、53.2l%(P=0.002)、l1.20%。细菌浓度在 l×10 CFU/L培养 24 h其抑菌率分别为35.7l%(P=O.OO4)、30.95% (P=0.012)、l1.11%,培养72 h其抑菌率分别为 65.11%(P=0.005)、54.04%(P=0.OO2)、16.17%;5.0 g/L的抗伴放线放线杆菌 IgY与 l×10 CFU/L牙龈二氧化碳噬纤维菌培养24 h其抑菌率为41.6l%(P=0.005),培养 72 h抑菌率为 86.99%(P=0.014)。
结论:伴放线放线杆菌能够诱导母鸡产生高效价的特异性 IgY抗体,该抗体在一定的浓度内有抑制伴放线放线杆菌和牙龈二氧化碳噬纤维菌生长的作用;伴放线放线杆菌与牙龈二氧化碳噬纤维菌存在着共同抗原。