重组Hepcidin融合蛋白的金属螯合亲和层析纯化
张 怀 袁其朋 朱亚平 马润 宇
在大肠杆菌中表达的重组Hepcidin融合蛋白以包涵体形式存在，其N端带有6个组氨酸。以Ni —IDA Sepha Fast Flo 为层析介质，在变性条件下以不同的咪唑和 pH值洗脱方式对 Hepcidin融合蛋白的纯化效果进行了比较，确定了该融合蛋白的金属螯合层析纯化条件。以60 mmol／L咪唑洗脱杂蛋白，然后将pH值降至4．0洗脱融合蛋白，纯化后的融合蛋 白纯度大于 95％，而 且不含咪唑，有利于下一步 Hepeidin的制备 。金属螯合层析中融合蛋白收率不低于 90％。Nin—IDA-Sepharose Fast Flow对该融合蛋白的吸附量为 30．4mg／mL。
