重组类人I型胶原蛋白分离与纯化

马晓轩 ，范代娣 ，王晓军，米 钰

目的：研究重组类人Ⅰ型胶原蛋白基因工程的下游工艺。
方法：工程菌株Escherichia coli BL21 3.1在Bioengingeering L1 523型12.8L自控发酵罐种经24h发酵，细胞干重达到77.3％g/l，表达量为菌体蛋白量的29.4％。发酵菌体经超声波破碎、硫酸铵沉淀后，依次经DEAE52，Sephadex G-100柱层析分离纯化。
结果：最终产物纯度达到98％，回收率为80.5％。
结论：纯化的类人Ⅰ型胶原蛋白经SDS-PAGE电泳测定为电泳纯，分子量为90ku，N端序列为NH2-H-D-P-V-V-L-Q-R-R-D-W-E-N-P-G，与基因序列涉及一致。

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