[抗原抗体] 基因免疫制备人PAK4单克隆抗体及其部分特性的鉴定

基因免疫制备人PAK4单克隆抗体及其部分特性的鉴定

背景与目的: 制备人 PAK4单克隆抗体可以用于临床诊断恶性肿瘤, 同时为深入探讨 PAK4蛋白的功能提供可靠途径。

材料与方法: 用重组 PAK4质粒 (以 P3XFLAG-CMV-10表达质粒为载体) 免疫 6～8 周龄雌性Balb/ C小鼠,通过细胞融合与克隆,筛选PAK4特异性单抗。

结果: 得到稳定分泌 PAK4抗体的单克隆杂交瘤细胞 2 株 , 分别命名为 2D1和 3H4; 间接 ELISA方法测得 2株4PAK4单抗腹水效价为 1∶1. 0×10 ;单抗亚类鉴定表明 2D1是 IgG类 ,3H4是 IgM类;免疫组化试验显示 2 株单抗均与临床两例乳腺癌组织管状上皮细胞高度反应。

结论: PAK4单克隆抗体特异性较好,可用于临床肿瘤组织诊断。